美國UniBest優佰達 ClearScan系列自動型標準款“兩蟲”檢測系統

一、方法原理簡介

標準依據：國家《中華人民共和國生活飲用水衛生標準》（GB 5749-2006）中增加了賈第鞭毛蟲和隱孢子蟲的微生物指標，要求為<1個/10L。該產品運用的檢測方法是國標規定的“兩蟲”IFA 檢測方法，采樣淘洗及 IMS 系統均符合國標及美國 EPA1623 的標準方法。

具體步驟如下：過濾采樣→淘洗濃縮→ IMS 磁分離→ IFA 染色→顯微鏡檢

二、主要特點及技術*性說明

（一）、兩蟲系統設計的標準性、合理性、適用性

1、 美國UniBest公司Compact 型兩蟲檢測儀 IFA 染色系統符合并優于中國國標。

2、 美國UniBest公司Compact 型兩蟲檢測儀 IMS 免疫磁分離系統采用國標 GB/T 5750.12-2006 方法。

3、 美國UniBest公司Compact 型兩蟲檢測儀過濾系統采用符合國際技術規范規定的一次性濾囊。

（二）、兩蟲系統的可靠性、穩定性

1、 過濾步驟回收率 ≥99%

2、 淘洗步驟回收率 ≥80%

3、 IMS 免疫磁分離步驟回收率 ≥90%

4、 總回收率（過濾、淘洗、磁珠分離、染色）≥ 35%

5、 檢測結果相對標準差 ≤10%

6、 鏡檢率：賈第鞭毛蟲孢囊 99%檢出，隱孢子蟲卵囊 99%檢出

7、 檢測可處理高濁度水樣：可達 100（NTU）

8、 試劑盒配備預制的陽性對照玻片，確保試劑盒的有效活性；避免誤檢，確保檢測的準確性。

9、 保質期長：美國 UniBest 優佰達公司 ClearScan 系列兩蟲 IFA 染色試劑保質期長達 24 個月，是業內保質期更長、性能更穩定的 IFA 試劑。

（三）、兩蟲系統的*性、準確性、經濟性

1、 標記單克隆抗體：包括抗隱孢子蟲抗體和抗賈第鞭毛蟲單克隆抗體的異硫氰酸熒光素（FITC），系一種的免疫球蛋白M五聚體，由5 個FITC結合點位同時標記一個抗體，具有顯著的明亮熒光效果，該抗體是國標推薦的染色試劑。

2、 提供固色液：固色液使顯色更穩定，幾天后仍不褪色鏡檢效果依然清晰。

3、 美國 UniBest 優佰達公司 ClearScan 系列 IFA 染色試劑已添加專用復染液，可使聚焦更準確，計數更清晰準確。

4、 提供陽性對照玻片：試劑盒（25 次測試量）中含一個預制的載玻片供時時自檢，使測試更便捷更省時。

5、 采樣過濾系統采用美國 EPA1623 標準推薦的一次性濾囊，杜絕樣品交叉污染；可以在不更改所有實驗儀器、試劑及器具的情況下替代其它品牌的一次性或多次使用的過濾器具。

6、 美國 UniBest 公司 ClearScan 系列兩蟲檢測系統，日常檢測運行成本與市場同類產品相比具有明顯優勢。

三、系統概述

（一）、采樣淘洗濃縮系統

采用符合中國國標及美國 EPA 要求的囊式過濾器對水樣進行過濾，將孢囊、卵囊及其他物質收集在過濾器上，該過濾器可用于實驗室及野外現場水樣過濾。濾囊利用兩蟲專用淘洗緩沖液將攔截在濾囊上的兩蟲振蕩洗脫下來，最后進行離心收集。

（二）、免疫磁分離系統（IMS）

IMS 過程使用美國 UniBest 優佰達公司的 ClearScan 系列兩蟲專用免疫磁分離試劑盒，利用帶有特異性抗體的磁珠與樣品中的賈第鞭毛蟲和隱孢子蟲特異性抗原相結合，在磁場中高效選擇性分離，該步驟可保證檢測的特異性。

（三）、IFA（間接免疫熒光）染色系統

使用美國 UniBest 優佰達公司的 Cellabs 型檢測賈第鞭毛蟲和隱孢子蟲診斷專用試劑盒（內含的免疫球蛋白 M 五聚體 FITC 單克隆抗體）對水樣中的兩蟲（抗原）進行熒光標記，同時利用細胞核染色劑 DAPI（4，6-二脒基-2-苯基吲哚）與細胞核中的雙鏈 DNA 結合發出熒光，排除假陽性反應，從而提高鏡檢準確性。

（四）、顯微鏡檢系統

使用兩蟲專用熒光顯微鏡對著色樣本進行檢測，觀察樣本，對符合孢囊和卵囊大小、外形、熒光特性的被觀察物依據國標 GB/T 5750.12-2006 中賈第鞭毛蟲孢囊與隱孢子蟲卵囊的特征（見尾頁）進行定性、定量分析。

五、備注

按照國標 GB 5750 12-2006《生活飲用水標準檢驗方法》規定，“兩蟲”檢測系統大致分為以下五個步驟，分別是：過濾采樣→ 淘洗濃縮→ IMS 磁分離→ IFA 染色→ 顯微鏡檢，其中過濾采樣僅僅是“兩蟲”檢測環節中的一個非核心步驟，實驗方法中所提到的過濾器的型號并不能斷章取義地代表兩蟲檢測的采樣方法實質，更不能以偏概全地代表兩蟲檢測全過程的檢測方法；過濾采樣器只是收集樣品的工具，而并非兩蟲檢測的關鍵技術，并且隨著兩蟲采樣技術的進步，只要使用的兩蟲采樣器達到樣本采集的目的即可；如果僅僅用一個過濾采樣器的型號來自稱是國標甚至國際標準的實驗方法，就會混淆了兩蟲檢測方法以及國家標準的本來實質。

美國 UniBest 優佰達集團的“兩蟲”檢測系統，采用的是一次性濾囊的過濾采樣方法，且性能指標不僅滿足而且優于國標（國標要求濾囊的孔徑為 1μm，我們的孔徑為0.45μm，更小的孔徑，更, 能, , , 保證兩蟲的 99%截留, ）。

“兩蟲”檢測的核心步驟在于 IFA（間接免疫熒光）染色，美國 UniBest 優佰達集團“兩蟲”染色試劑是國標核心步驟的染色試劑。