血球計數板

血球計數板

，是指—種常見的生物學工具。用以對人體內紅、白細胞進行顯微計數，也常用于計算一些細菌、真菌、酵母菌等微生物的數量。是一塊特制的厚型載玻片，載玻片上有四個凹槽，構成三個平臺。中間的較寬平臺被一短橫槽分隔成兩半，每個半邊上面各刻有一小方格網，每個方格網共分九個大格，的一大格作為計數用，稱為計數區。

計數區的刻度有兩種：一種是計數區分為16個大方格（大方格用三線隔開），而每個大方格又分成25個小方格；另一種是一個計數區分成25個大方格（大方格之間用雙線分開），而每個大方格又分成16個小方格。但是不管計數區是哪一種構造，它們都有一個共同特點，即計數區都由400個小方格組成。

注意事項：

1.鏡檢計數室。因前一次清洗不到位，或者保存過程中存在污染，更或者因操作不當導致的計數室存在劃痕，若不及時清洗或更換，則會對后期實驗計數產生極大影響。所以，在每次使用血球計數板之前都需要加一步鏡檢計數室，如若在鏡檢時發現計數室有污物，則需按要求清洗并吹干后再進行實驗。

2. 搖勻后取液。在吸出培養液進行計數之前，需輕輕震蕩試管，使菌體分布均勻，防止聚沉淀，從而提高計數的代表性和準確性。

3. 先蓋血蓋片后加菌液。在菌懸液搖勻后，應先在血球計數板上蓋上血蓋片，再用滴管吸取少許菌懸液，從計數區中間平臺沿血蓋片的上邊緣滴入一小滴菌懸液，利用液體的表面張力一次性充滿計數區。若先加菌液再覆蓋血蓋片，則容易因為菌液加入過多，而導致血蓋片未與血球計數板支持柱接觸，血蓋片浮于菌液上方而導致計數偏大，同時會因為有氣泡產生而導致計數偏小。

4. 靜置片刻再計數。靜置5 min，待菌懸液不再漂浮流動，酵母菌全部沉降后再將血球計數板放到顯微鏡下進行計數。先在低倍鏡下找到需要觀察計數的大方格及中方格，將中方格移到視野，然后撥動轉換器移至高倍鏡進行計數。

5. 高倍鏡下調亮度。低倍鏡下，用平面鏡和小光圈，可以清晰地看到血球計數板上的酵母菌。但是，撥動轉換器換到高倍鏡后，即使是用了平面鏡和小光圈，視野里往往還是白茫茫一片，什么都看不見，這時候可以嘗試操作遮光器上的金屬遮光片進行遮光處理。因為活的酵母菌和培養液的折光率相近，所以要在高倍鏡下將視野調得暗一些。

6.掌握計數原則。一般選擇觀察的菌液濃度控制在每個小方格內有4或5個菌體為宜，若其濃度太高，可適當稀釋；并采用“計上不計下，計左不計右”的計數原則。